1. Một oligonucleotide đôi-stranded tổng hợp có một kết thúc cùn, trong khi bên kia có một phần mở rộng nucleotide có thể căn cứ cặp với một kết thúc cố kết tạo bởi cát khai của một phân tử DNA với một loại hình cụ thể II hạn chế endonuclease. Cùn cuối của tử có thể được ligated để kết thúc của một phân tử DNA mục tiêu và xây dựng có thể được nhân bản thành một véc tơ bằng cách sử dụng cố kết thúc của vỉ.

2. a tổng hợp đơn-stranded oligonucleotide rằng, sau khi self-hybridization, sản xuất một phân tử với cố kết thúc và một trang web nội bộ hạn chế endonuclease. Khi vỉ được đưa vào một vector nhân bản bằng cách cố kết thúc, chuỗi nội bộ cung cấp một trang web mới endonuclease hạn chế.