Điều kiện phản ứng - đáng chú ý là nhiệt độ, muối concentration(s) và độ pH - mà dictate ủ của đĩa đơn-stranded ADN/ADN, DNA/RNA và RNA/RNA lai. Lúc cao stringency, hai hộ hình thức duy nhất giữa sợi với hoàn hảo-một bổ; stringency thấp hơn cho phép làm cho deo giữa các sợi với một số mức độ không phù hợp giữa các căn cứ.